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    1956年巴黎卢浮宫接到远在瑞士的一份捐赠声明，捐赠者为意大利裔流亡富商巴托洛米欧·尤斯塔皮奥。但对于《蒙娜丽莎》草图一事学术界多年众说纷纭一直没有定论。直到2001年以后借助先进的X光分析技术，《蒙娜丽莎》草图绘画颜料显示作品约绘于1504年前后。

    草图的用笔痕迹明显表明为左撇子用笔习惯，画作左上角为达·芬奇的签名，经鉴定决非仿制，符合达·芬奇的签名习惯。左下角为第一任收藏人安吉罗·鲁菲尼的印章，达·芬奇的多幅创作草图，以及素描作品均有安吉罗·鲁菲尼的收藏印章。草图用笔大胆奔放，颜料厚重，效果强烈是达·芬奇少有的作品风格，造型却不失严谨，构图基本与《蒙娜丽莎》原作无二，只是背景略有不同，可以断定作品仅在一小时之内即完成。